До настоящего времени остаются нерешенными вопросы ранней диагностики колоректальных ворсинчатых новообразований, достоверного выявления злокачественной трансформации и единого подхода к лечению. Очевидно, именно этим обстоятельством можно объяснить определенный процент расхождения результатов дооперационного обследования больных с крупными ворсинчатыми опухолями и морфологическими исследованиями удаленных новообразований. Благодаря успехам биохимии и молекулярной биологии в настоящее время в арсенале исследователей и клиницистов имеется огромное количество биологически значимых показателей, которые могут помочь в диагностике раннего колоректального рака, возникшего на фоне ворсинчатого новообразования и, соответственно, в выборе адекватного метода лечения. Появились принципиально новые возможности использования антител, как наиболее чувствительных из существующих сегодня биологических маркеров клеток и их компонентов.
Цель исследования: Выявить значение тканевых биомаркеров р53, Ki-67, РЭА для оценки степени злокачественной трансформации ворсинчатых опухолей.
Материалы и методы исследования: 43 препарата ворсинчатых аденом толстой кишки подвергались иммуногистохимическому исследованию, включавшему исследование экспрессии раково-эмбрионального антигена с помощью МКАТ клона 12-140-10 (фирма Novocastra, Великобритания) к белку CD 66e или раково-эмбриональному антигену (РЭА), онкобелка гена р53 с помощью МКАТ клона D07 (фирма Novocastra) к мутантному белку гена - супрессора р53 и маркера пролиферации Ki-67 с помощью МКАТ клона MIB-1 (фирма DakoCytomation, Дания) к ядерному белку Ki-67. В качестве системы визуализации использовали наборы LSAB2 (DAKO) и Novostain (NovoCastra). В качестве негативного контроля срезы инкубировали с нормальной сывороткой животного, от которого были получены первые антитела, а также с PBS. Позитивным контролем служила нормальная ткань слизистой оболочки кишки, а также ткань аденокарцином различных локализаций (молочной железы, желудка, легкого).
Результаты. Антитела к РЭА в ворсинчатых полипах окрашивали только апикальную часть эпителия ворсинок. В порсинчатых полипах средний индекс Ki-67 (количество позитивно окрашенных клеток) составил 5,5±0,38%. При диспластических изменениях в эпителии интенсивность пролиферации усиливалась, и индекс пролиферации составлял 12,1+0,45%. Экспрессия мутантного белка гена р53 была негативной в 8 и позитивной в 35 наблюдениях ворсинчатых полипов. Ki-67 -позитивные ядра опухолевых клеток обнаружены во всех клетках неопластических желёз, независимо от степени дифференцировки. Средний индекс Ki-67 в опухоли составил 62,5±2,78%. Раково-эмбриональный антиген в 80% наблюдений выявлялся в клетках ярко, умеренно в 20% .В подавляющем числе наблюдений колоректального рака - в 80%- выявлена яркая экспрессия мутантного белка гена р53. Реакция носила характер равномерного окрашивания всех ядер клеток опухоли и не зависела от степени дифференцировки опухоли.
Выводы. Мутация гена р53 свидетельствует о переходе ворсинчатой аденомы толстой кишки в рак; экспрессия РЭА прямо пропорциональна степени дифференцировки колоректального ворсинчатого новообразования; при диспластических изменениях в эпителии ворсинчатых аденом нарастает интенсивность пролиферации (индекс Ki-67).